ตัวอย่างน้ำ ชุดทดสอบการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ Vibrio Harveyi กรดนิวคลีอิกแบบเรียลไทม์ PCR

ชุดตรวจหา V. Harveyi(VH) ชุดตรวจหากรดนิวคลีอิก

(วิธี PCR-Fluorescent Probe)
 
การใช้งานที่ตั้งใจไว้:
 
ชุดนี้เหมาะสำหรับการตรวจหาเชื้อ Vibrio harveyi (VH) ที่ทำให้เกิดโรคโดยเฉพาะในเหยื่อ ตัวอย่างน้ำ ต้นกล้ากุ้ง เนื้อเยื่อกุ้ง และผลิตภัณฑ์แปรรูป
 
หลักการ:
 
ชุดนี้ได้รับการคัดเลือก ชิ้นส่วนเฉพาะของ V. Harveyi (VH) เพื่อออกแบบโพรบโพรบไพรเมอร์ หัวโพรบที่มีพื้นที่ขยายสัญญาณไพรเมอร์อยู่ตรงกลางของแม่แบบดีเอ็นเอการจับเฉพาะ ในกระบวนการขยาย PCR เอ็นไซม์ Taq พอลิเมอเรสที่ถูกจำกัดจาก 5 'ปลายของกลุ่มเรืองแสงบนโพรบจะถูกตัดลง ทำให้เป็นอิสระในระบบปฏิกิริยา ดังนั้นการดับกลุ่มจาก 3' สิ้นสุด กรดนิวคลีอิก Vibrio haviovibrio (VH) ถูกตรวจพบโดยเครื่องมือ PCR เรืองแสงในระบบปฏิกิริยาปิดสนิท .
 
องค์ประกอบหลัก:
 

 
ข้อกำหนดตัวอย่าง:
 
1. ประเภทตัวอย่าง:
ต้นกล้ากุ้ง เนื้อเยื่อกุ้ง ตัวน้ำ เหยื่อ ผลิตภัณฑ์แปรรูป ฯลฯ
2. การเก็บตัวอย่างและการขนส่ง:
การรวบรวมและขนส่งตัวอย่างต้องดำเนินการตาม NY/T 541 ตัวอย่างจะต้องถูกขนส่งไปยังห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุดภายใต้สภาวะที่แช่เย็นเพื่อหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำ
3. การเก็บตัวอย่าง:
สามารถเก็บไว้ได้ 24 ชั่วโมงที่ 2 ℃ ~ 8 ℃ และสามารถเก็บไว้ได้นานที่ -20 ℃

 
การใช้ Micgene 242/244/44IVD และ ABI QuantStudio5:
 
มีการกำหนดขั้นตอนดังต่อไปนี้:

FAM ถูกเลือกเป็นช่องทางการตรวจจับ
 
ผลการตีความ

หมายเหตุ: ผลลัพธ์จะถือว่าเป็นพื้นที่สีเทา ซึ่งต้องตรวจสอบอีกครั้งหากผลการตรวจสอบใหม่เป็นค่า Ct < 45 ให้ถือว่าเป็นค่าบวก และไม่มีค่า Ct หรือค่า Ct ≥45 ให้ถือว่าเป็นค่าลบ
 
การวิเคราะห์ผลลัพธ์:
การวิเคราะห์อัตโนมัติโดยใช้เครื่องมือวัด
 
ควบคุมคุณภาพ:
การควบคุมเชิงลบ: ไม่มีเส้นขยายที่ชัดเจนของช่องการตรวจจับ FAM;
การควบคุมที่เป็นบวก: ช่อง FAM แสดงเส้นโค้งการขยายที่ชัดเจน, ค่า Ct ≤30;
 
ตรงตามเงื่อนไขข้างต้นพร้อมกันในการทดสอบเดียวกันมิฉะนั้น การทดสอบจะไม่ถูกต้องและจำเป็นต้องทำการทดสอบซ้ำ